Kvantový test (QuantiFERON®-TV Gold) je moderní laboratorní test pro detekci tuberkulózní infekce, alternativa ke klasickému kožnímu testu s tuberkulinem. V současné době bylo v různých zemích vyvinuto a vydáno velké množství národních doporučení pro použití tohoto testu.
Kvantiferonový test je založen na stanovení INF-γ (interferonu gama) uvolňovaného senzibilizovanými T buňkami stimulovanými in vitro specifickými proteiny (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) mycobacterium tuberculosis, členy skupiny komplex Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum aj.). Tyto proteiny chybí ve vakcinačních kmenech M. bovis BCG a ve většině netuberkulózních mykobakterií, s výjimkou M. kansasii, M. szulagai a M. marinum.
Obsah INFγ je stanoven v krvi pacienta (ze zkumavky s TV antigenem), výsledek je analyzován ve spojení s daty získanými ze 2 dalších zkumavek (sloužících jako kontrola).
Přibližně 1/3 světové populace je infikována MTB a pouze 5-10 % infikovaných jedinců onemocní. Za přítomnosti nepříznivých faktorů se může latentní tuberkulózní infekce (LTBI je stav, kdy je v lidském těle přítomno Mycobacterium tuberculosis (MBT), ale nejsou zde žádné klinické a radiologické známky tuberkulózy) aktivovat s rozvojem mimoplicní tuberkulózy (např. například renální tuberkulóza).
Do vysoce rizikové skupiny pro MTB infekci patří osoby, které měly kontakt s pacientem s tuberkulózou, nebo mají vysokou pravděpodobnost kontaktu (pracovníci protituberkulózních ambulancí, azylových domů, nápravných ústavů apod.), dále osoby s doprovodným onemocnění (infekce HIV, diabetes mellitus atd.).
Kožní testy používané k diagnostice LTBI – Mantoux test a Diaskintest® – mají řadu kontraindikací a omezení pro použití.
Kontraindikace testů Mantoux a Diaskintest:
- Individuální nesnášenlivost tuberkulinu;
- Akutní a chronické infekční nemoci a somatické nemoci během exacerbace;
- Kožní onemocnění a alergické stavy během exacerbace;
- Karanténní období v dětských kolektivech.
U pacientů s individuální přecitlivělostí na tuberkulin se může objevit falešně pozitivní reakce.
Srovnání testů pro diagnostiku tuberkulózní infekce
| Parametr | Mantoux test | Diaskintest® | kvantiferonový test |
|---|---|---|---|
| Metoda výzkumu | Kožní test | Kožní test | Krevní test |
| Nežádoucí reakce | Jsou možné | Jsou možné | Ne |
| Kontraindikace | K dispozici je | K dispozici je | Ne |
| Specifičnost | Nízká | Vysoký | Vysoký |
| Falešně pozitivní výsledky po BCG vakcinaci | Ano | Ne | Ne |
| Závislost na načasování preventivních očkování | Ano (ne dříve než za měsíc) | Ano (ne dříve než za měsíc) | Ne |
| Interpretace výsledků | Subjektivní | Subjektivní | Objektivní |
Výhody kvantiferonového testu:
- žádné kontraindikace nebo časové omezení;
- absence falešně pozitivních výsledků v případě očkování BCG;
- bezpečnost postupu a nepřítomnost nežádoucích reakcí;
- interpretace výsledků tohoto testu je méně subjektivní než interpretace výsledků tuberkulinových kožních testů;
- vysoká specificita (99,1 %) a vysoká citlivost (89,0 %).
Indikace pro použití kvantiferonového testu:
- Identifikace LTBI u rizikových skupin: pracovníci specializovaných antituberkulózních a jiných pracovišť, kde je vysoké riziko kontaktu s původcem nebo pacient s tuberkulózou, pacienti se souběžnými onemocněními apod.;
- Přítomnost známých kontaktů s pacientem s tuberkulózou (bakterioexcretor);
- Přítomnost pozitivního testu Mantoux k vyloučení postvakcinační reakce;
- Přítomnost kontraindikací tuberkulínových kožních testů (testy Mantoux a Diaskintest®);
- Diferenciální diagnostika infekcí způsobených MBT;
- Průzkum imigrantů.
Příklad výsledku výzkumu a interpretace:
Poznámka: Tento test nerozlišuje mezi latentní a aktivní tuberkulózou. V případě pozitivního výsledku je nutná konzultace s lékařem TBC ke stanovení další taktiky. Hladina interferonu gama nekoreluje se stádiem a rozsahem infekce, úrovní imunitní reaktivity nebo pravděpodobností aktivace latentní tuberkulózy.
| Parametr | Výsledek | Kritéria hodnocení výsledků |
|---|---|---|
| Obsah interferonu gama v kontrolní zkumavce (NIL) | 0,05 | Do 8,00 |
| Obsah interferonu gama ve zkumavce s TV antigenem (TV Ag) | 0,09 | Méně než 0,35 (nebo více než 0,35, ale až 25 % kontrolní hodnoty NIL) |
| Obsah interferonu gama ve zkumavce s mitogenem (Mitogen) | 9,56 | Z 0,50 |
| Kvantiferonový test (diagnostika tuberkulózy) | Záporný | Záporný |
Interpretace výsledků QFT:
Negativní – infekce komplexem M. tuberculosis není pravděpodobná.
Pozitivní – je pravděpodobná infekce komplexem tuberkulózy M.
Pochybné – kvůli citlivosti na antigen TBC.
Interpretace výsledku výzkumu
- MBT infekce;
- Infekce netuberkulózními mykobakteriemi (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).
- Individuální charakteristiky imunity;
- Porušení preanalytických požadavků.
V tomto případě lékař rozhodne buď o odběru nového vzorku krve, nebo o provedení jiných lékařských testů.
- Nevylučuje infekci MBT nebo tuberkulózu.
Falešně negativní výsledky mohou být:
- V časných stádiích infekce;
- Při stavech imunodeficience;
- U dětí
- Pokud nejsou splněny předanalytické požadavky.
Varování! Interpretace výsledků by měla být provedena s přihlédnutím ke klinické a epidemiologické anamnéze a výsledkům jiných diagnostických studií.
Metoda výzkumu: enzyme-linked immunosorbent assay.
Materiál pro výzkum: krev (speciální sada tří zkumavek, která se používá pouze pro studii Quantiferon Test).
Délka studia: 3-10 pracovních dnů.
Příprava na studium: Odběr krve se provádí ráno přísně na lačný žaludek (nebo ne dříve než 8 hodin po posledním jídle).
Všechny 3 zkumavky jsou dodávány do laboratoře CMD vložené do balíčku „Sada zkumavek pro test Quantiferon“!
Obecně je tuberkulóza zákeřná nemoc. Rozvíjí se pomalu a neznatelně, a když se objeví zjevné příznaky, prognóza se stává velmi vážnou i při moderní léčbě. To se stává zvláště často u dětí.
Nejběžnější laboratorní metody pro včasnou diagnostiku tuberkulózy u dětí jsou Mantoux test a Diaskintest.
Nejdražší jsou Quantiferon a T-SPOT.
Existuje také ELISA na protilátky proti mykobakteriím a PCR na tuberkulózu.
Pojďme si je probrat popořadě, ale pokud spěcháte, na konci je krátké shrnutí.
Mantouxova reakce
Používá se již více než 50 let a samotná metoda má staletí starou historii. Test Mantoux je starý, ale vůbec ne zastaralý: stále se používá po celém světě!
Koná se zdarma jednou ročně pro všechny děti do 1 let včetně.
Proč potřebuji Snaž se?
1. Identifikovat děti, které se nakazily, i ty, které jsou již nemocné. Test stejně dobře reaguje jak na plicní tuberkulózu, tak na mimoplicní formy, které se nejčastěji vyskytují před 7-8 rokem života.
2. Druhým cílem je zjistit, zda se u dítěte po BCG vakcinaci vyvinula imunita vůči tuberkulóze. Negativní testy Mantoux ukazují, že neexistuje žádná ochrana a pomoc při identifikaci dětí, které jsou přeočkovány ve věku 6-7 let.
Jak se to určuje, je zde.
Co představit dítěti?
Purifikovaný tuberkulin je proteinový koncentrát získaný z bakterií tuberkulózy.
V přípravku nejsou žádné mikroby! Stupeň čištění od cizích nečistot je velmi vysoký a je řízen podle standardu GMP. Celosvětově jsou certifikovány pouze tři takové léky: vyrobené v USA, Dánsku a naše vlastní.
Někteří rodiče mají obavy z fenolu ve výrobku, ale v takovém množství není nebezpečný. Podstatně více fenolu se v těle tvoří denně při metabolismu bílkovin, vdechujeme ho vzduchem a vylučujeme močí. Fenol v testu Mantoux je kapkou v moři.
Lék se aplikuje intradermálně do předloktí a výsledek se hodnotí pomocí pravítka po 72 hodinách při kontrolní návštěvě.
Vlastnosti
Test je pozitivní u dětí očkovaných proti tuberkulóze, tedy u většiny. U těch dětí, které onemocněly tuberkulózou nebo se právě nakazily, bude test Mantoux také pozitivní. Proto existují kritéria, podle kterých lékař rozlišuje normální pozitivní test Mantoux od patologického. A nejde jen o velikost!
Někdy může být těžké na věci přijít. Poté je dítě odesláno na další vyšetření, které provádí ftiziatr. To ale neznamená, že budete registrováni na tuberkulózu. Nejčastěji se záležitost omezuje na jednoduché vyšetření, méně často – Diaskintest. Ještě méně často je potřeba hlubší diagnostika. Takto se identifikují děti, které potřebují léky. V průměru je to méně než 1 % těch, kteří měli pozitivní test na Mantoux.
Test Mantoux je často kritizován za to, že poskytuje velké množství falešně pozitivních výsledků, ale to je nesprávné obvinění! Ve většině případů pozitivní Mantouxův test není známkou tuberkulózy, ale důkazem, že dítě je chráněno před infekcí BCG vakcínou. Pro správnou interpretaci výsledků byl vyvinut speciální protokol, který lékaři vždy používají.
Má to ale i vážnou nevýhodu! Některé děti mají zvýšenou citlivost na tuberkulin nebo jsou výsledky testů zkreslené kvůli alergiím. Pak se test Mantoux stává pro rodiče bolestí hlavy, protože pokaždé končí výletem do tuberkulózní ambulance. Nyní pro takové děti existují alternativy.
Diaskintest
V roce 2008 byla vytvořena v biotechnologické laboratoři Výzkumného ústavu molekulární medicíny Moskevské lékařské akademie pojmenované po JIM. Sechenov. Nahradily test Mantoux pro děti ve věku 8 až 17 let.
Proč potřebuji Snaž se?
Pouze k identifikaci dětí nemocných nebo nakažených tuberkulózou. Na rozdíl od Mantouxu není vhodný pro výběr dětí k přeočkování BCG.
Co se dává dítěti?
Uměle vyrobený – rekombinantní – protein bacila tuberkulózy, který obsahuje pouze 2 antigeny. V tuberkulinu pro test Mantoux je jich podstatně více. Proto je Diaskintest lépe snášen alergiky. Čím méně různých antigenů vstoupí do těla, tím nižší je riziko alergické reakce na každý z nich.
Někteří rodiče se obávají, že protein pro Diaskintest se získává pomocí genetického inženýrství, ale není nebezpečný! Geneticky modifikované nejsou lidé, ale bakterie – E. coli. Tradičně se používá ve farmakologii jako továrna na syntézu potřebných proteinů. To dělá mnoho moderních léků, například inzulín.
Fenol, stejně jako jiné konzervační látky, je také přítomen v malých dávkách. Způsob podání a princip vyhodnocení výsledku jsou obdobné jako u testu Mantoux.
Vlastnosti
Pozitivní diaskintest je vzácný – pouze u těch, kteří se nakazili nebo onemocněli. A to je vždy důvod navštívit ftizetra a podstoupit další vyšetření. U zdravých dětí očkovaných proti tuberkulóze bude test negativní.
To je na jednu stranu plus, ale na druhou stranu nelze určit, zda dříve podané BCG očkování dítě chrání, nebo zda je čas na přeočkování.
A ještě jedna nuance. Řada vědců se domnívá, že diagnostická hodnota Diaskintestu u malých dětí je snížena a existuje možnost chybějící extrapulmonální tuberkulózy. Riziko chyby je zvláště vysoké ve skupinách dětí do 2 let.
Výzkum účinnosti testu stále probíhá, proto je zatím jednoznačně doporučen pouze pro děti ve věku 8 let a starší. Ale pokud si přejete, můžete nahradit test Mantoux testem Diaskintest a provést to bez jakýchkoli potíží.
T-SPOT a Kvantiferon
Lze je posuzovat společně, protože tyto analýzy jsou velmi podobné. Je jednodušší najít laboratoř, která dělá T-SPOT, i když test QuantiFERON je o něco levnější.
Proč potřebujeme?
V tomto ohledu jsou úplnými analogy Diaskintestu. Na základě výsledků T-SPOT a QuantiFERON lze s vysokou pravděpodobností určit, že je člověk nakažen tuberkulózou nebo je nemocný. Tyto testy nijak nereagují na BCG očkování.
Co se dává dítěti?
vůbec nic. Krev se dítěti odebírá ze žíly. Poté provedou test se stejnými antigeny jako v Diaskintestu, pouze reakce neprobíhá v kůži, ale ve zkumavce. Alergie jsou v podstatě nemožné.
Vlastnosti
Tyto testy mají zatím celosvětově omezené použití, především kvůli jejich vysoké ceně. Proto je počet studií o jejich účinnosti omezený. Většina vědců považuje tyto testy za přesné a slibné, ale stále existují otázky ohledně interpretace výsledků a definice pojmu „norma“ v různých věkových kategoriích.
Tyto testy produkují zvláště mnoho falešně negativních výsledků u dětí (1, 2). Proto se u nás pro screening dětí na tuberkulózu nedoporučují testy T-SPOT a QuantiFERON.
Používají se pouze pro hlubší diagnostiku. Test Mantoux nebo Diaskintest však můžete nahradit jedním z nich, pokud si to přejete a na vlastní náklady. Kromě toho budete muset navštívit ftiziatra, aby mohl učinit závěr o nepřítomnosti příznaků aktivní plicní tuberkulózy u dítěte.
Test na protilátky (ELISA) a PCR na tuberkulózu
To jsou úplně jiné testy. Daly se dohromady z jediného důvodu: je úplně zbytečné je dělat, když chcete získat vysvědčení do školky nebo školy.
Protilátky hrají u tuberkulózy velmi nevýznamnou roli, hlavní je buněčná imunita. V krvi mohou a nemusí být protilátky, ale to lékaři nic neřekne o skutečnosti infekce nebo onemocnění, protože samotná analýza má velmi nízkou specificitu a citlivost. Používá se pouze jako doplňková metoda, když již byla stanovena diagnóza tuberkulózy.
Co se týče PCR, je to super přesná metoda. Dokáže najít nepatrné množství bakterií tuberkulózy, pokud jsou samozřejmě přítomny ve studovaném materiálu. Ale nemá smysl dělat krevní test: bacil tuberkulózy se do krve dostane jen při sepsi, těžké komplikaci infekce, do moči, při postižení ledvin tuberkulózou a podobně. Chcete-li dostat bakterie z plic, musíte propláchnout průdušky. Je nepravděpodobné, že by někdo takhle mučil dítě kvůli vysvědčení.
Resumé z NaPopravku
1. Mantoux, Diaskintest a další testy nejsou očkováním a nemohou se nakazit tuberkulózou, i když se sestra splete s dávkou nebo podá lék špatně.
2. Z hlediska zdravotního dopadu: Mantoux a Diaskintest jsou zcela neškodné, T-SPOT, QuantiFERON test a další krevní testy jsou doprovázeny rizikem nitrožilní intervence. Poškození z odběru krve v moderní diagnostice je samozřejmě spíše formalita než reálné nebezpečí.
3. Dětem do 7 let včetně se doporučuje podstoupit test Mantoux (3). Jedině tak lze ověřit, zda je dítě chráněno proti tuberkulóze, a je to poměrně přesná metoda pro diagnostiku jakékoli formy tuberkulózy.
4. Místo Mantoux můžete udělat Diaskintest. Nebudete tak vědět, zda vaše dítě potřebuje BCG přeočkování, ale vyloučíte aktivní a latentní tuberkulózu, snadno získáte potvrzení do školky nebo školy a snížíte riziko alergií, pokud by byly kvůli testu Mantoux.
Diaskintest se doporučuje pro všechny děti a dospívající ve věku od 8 do 17 let. Od 15 let je navíc nutná roční fluorografie (3).
5. Pokud má vaše dítě vysoké riziko tuberkulózy a máte větší obavy o přesnost diagnózy než o potvrzení, proveďte Mantoux test i Diaskintest. Je to možné ve stejný den, ale v jiných rukou. Předpokládá se, že tyto testy fungují nejúčinněji v kombinaci.
6. Pokud jsou problémy nejen s testem Mantoux, ale i s Diaskintestem, nebo si kategoricky nechcete nic zavádět do těla, jsou dvě možnosti. První je pořídit rentgenový snímek plic dítěte nebo fluorogram. Druhým je darování krve ze žíly na diagnostiku pomocí T-POTS nebo QuantiFERON.
Rentgenové záření je vystaveno radiaci a není tou nejlepší volbou pro malé děti. Odběr krve ze žíly u dítěte, zvláště malého, je náročnou zkouškou pro všechny: rodiče, zdravotnický personál i dítě samotné. Kromě toho jsou T-SPOT a Quantiferon drahé.
Pro potvrzení si každopádně budete muset zajít k ftiziatrikovi, takže je lepší začít u něj. Váš lékař vám může nabídnout možnost individuální diagnostiky.
7. Test na protilátky nebo PCR na tuberkulózu nestačí k přijetí dítěte do dětského kolektivu a neslouží k primární diagnostice.
8. Pokud odmítnete všechny typy diagnostiky tuberkulózy, dítě s největší pravděpodobností nebude z právních důvodů umožněno celodenní výuce ve školce nebo škole.
Základem pro poslední tři body jsou Klinické pokyny „Detekce a diagnostika tuberkulózy u dětí vstupujících a studujících ve vzdělávacích institucích“ (ke stažení zde).