Analýza chlamydií u žen: jak provést test, diagnostické metody, jak se odebírá biomateriál na chlamydie pomocí PCR, IHA, ELISA, RIF?

Chlamydie je infekční onemocnění způsobené chlamydiemi a přenosné pohlavním stykem. Kromě toho je možný kontaktní přenos z domácností, stejně jako prostřednictvím sdílených hygienických produktů. Děti se mohou nakazit i při průchodu porodními cestami matky s chlamydiemi. Chlamydie mohou vést ke komplikacím, jako je chronická prostatitida u mužů, zánětlivá onemocnění pánevních orgánů u žen a další negativní důsledky. Přítomnost chlamydií navíc často vede k předčasnému ukončení těhotenství.

Podle vědců a WHO trpí urogenitálními chlamydiemi ročně asi 100 milionů lidí a počet všech infikovaných lidí na světě dosahuje 1 miliardy Zároveň jsou rozšířené asymptomatické a atypické formy onemocnění. Proto je výběr účinné analýzy na chlamydie jedním z naléhavých problémů moderní venerologie.

Metody laboratorní diagnostiky chlamydií: jejich vlastnosti a účinnost

Diagnostika chlamydií je považována za poměrně obtížnou. Je třeba poznamenat, že pro studii se neodebírá nátěr, ale škrábání (buňky nemocného orgánu). K analýze se také používá krev, moč a sperma. Přesnost zvolené analýzy se pohybuje od 15 % do 100 % v závislosti na použité metodě. V současnosti se k detekci Chlamydia trachomatis používá šest hlavních testů: stěr (scraping), RIF, PCR analýza na chlamydie, kultivace chlamydií, ELISA a testovací proužky.

Laboratorní diagnostické metody pro chlamydie

Mikroskopická analýza

Jedná se o typ laboratorního testu, který zahrnuje odběr celkového stěru: u žen – z děložního čípku, pochvy a vnějšího otvoru močové trubice, u mužů – z močové trubice.

Výhodou analýzy je její nízká cena. Ale pravděpodobnost odhalení chlamydií tímto způsobem je pouze 15%. Z tohoto důvodu někteří dermatovenerologové nedoporučují mikroskopickou diagnostickou metodu pro detekci chlamydií.

testovací proužky

Výhodou je rychlost a nízká cena, přesnost však nepřesahuje 20 %.

Imunofluorescenční reakce (IF)

Materiál pro studii se odebírá z cervikálního kanálu nebo močové trubice a poté se analyzuje pod fluorescenčním mikroskopem.

Přesnost testu RIF je až 50 %. Pro detekci infekce pomocí této techniky je nutné, aby bylo k dispozici velké množství materiálu k analýze a onemocnění bylo v aktivní fázi. Jsou také možné falešně pozitivní výsledky. Proto se tento typ diagnostiky, jako je imunofluorescenční reakce, nedoporučuje používat k detekci Chlamydia trachomatis.

Enzymová imunoanalýza (ELISA)

Krevní test, který detekuje protilátky proti chlamydiím: IgM, IgA, IgG. Výhodou metody je, že nejen identifikuje infekci, ale také naznačuje, v jakém stadiu se onemocnění nachází – akutní nebo chronické.

Protilátky IgM indikují akutní stadium (obvykle zjištěno pět dní po infekci). Během prvních 10 dnů po objevení se chlamydií je v krvi detekován IgA. Během stejného období nebo po 2-3 týdnech lze detekovat protilátky IgG. V chronických případech onemocnění zůstávají v krvi protilátky IgG a IgA.

Nevýhodou testu ELISA na chlamydie je jeho nízká citlivost. Podle různých výzkumníků činí až 78 %. Zvýšení přesnosti testu (více než 90 %) je možné pouze v případě vysokého obsahu antigenu v testovaném materiálu. Nízký obsah antigenu zároveň prudce snižuje citlivost metody (přesnost testu je menší než 60 %).

Kultura chlamydií

Metoda izolace Chlamydia trachomatis v buněčné kultuře. Hlavní výhodou je vysoká přesnost (záchyt chlamydií v 75-90 % případů) a možnost okamžitě určit, na která antibiotika je infekce citlivá.

Kultivace však neumožňuje diagnostiku přibližně u 20–25 % žen s chlamydiovou cervicitidou a 10–15 % mužů s chlamydiovou infekcí močové trubice. Mezi další nevýhody analýzy patří její vysoká cena, pracnost a dlouhé čekání na výsledky (obvykle 3-7 dní).

Kultivace byla dříve považována za „zlatý standard“ pro detekci chlamydií. Dnes se doporučuje kultivační metodu kombinovat s metodami DNA diagnostiky s potvrzením negativního výsledku kultivace pomocí PCR testu na chlamydie.

Metoda polymerázové řetězové reakce (PCR).

Metoda je založena na detekci sekvencí DNA nebo ribozomální RNA specifických pro Chlamydia trachomatis. V posledních letech se úspěšně využívá real-time PCR (RT-PCR).

Hlavní výhodou genetické diagnostiky je vysoká přesnost testů. Senzitivita testu podle různých zdrojů dosahuje asi 92 % a specificita je 95 %. Navíc je k analýze potřeba jen malé množství materiálu a výsledky jsou hotové za 1-2 dny. Falešně pozitivní výsledky jsou možné pouze v případě porušení procesu shromažďování, přepravy a zpracování materiálu, stejně jako nesprávného provádění samotné analýzy.

Materiálem pro PCR test na chlamydie je krev nebo nátěr. Metoda polymerázové řetězové reakce nám umožňuje určit patogen bez ohledu na lokalizaci infekčního procesu a identifikovat patogen v období sérologického okna – kdy již došlo k infekci, ale ještě nejsou vytvořeny protilátky.

Je však důležité si uvědomit, že negativní výsledek u ženy s neplodností nemusí vždy znamenat nepřítomnost infekce. Proto se při diagnostice chlamydií u žen v reprodukčním věku doporučuje použít dvě nezávislé diagnostické metody najednou. Například PCR a ELISA nebo PCR a kultivace. Tento přístup se nazývá „dvojitý zlatý standard“. V tomto případě se potvrzení pozitivního výsledku získaného touto metodou nevyžaduje. Tato technika se doporučuje jako preferovaná při diagnostice chlamydií.

Napsat komentář